福建省莆田一中2021-2022学年度高二下学期期末考试生物试卷答案

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19.(16分，每空2分)(1)编码蛋白质的基因AtCBFI基因(2)使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使目的基因DNA解聚为单链(3)DNA连接酶使目的基因和质粒定向连接、防止目的基因和质粒自身环化(4)抗原一抗体杂交在低温胁迫条件下，观察植株生长状况【解析】(1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因，根据题干信息可以判断这项研究中的目的基因是AtCBFI基因。(2)在扩增AtCBFI基因的过程中，先根据AtCBFI基因的核苷酸序列设计引物，再进行PCR扩增，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解聚为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在热稳定DNA聚合酶的作用下进行延伸，如此重复循环。反应体系的初始温度设置在90℃以上的目的是使目的基因DNA受热变性后解聚为单链。(3)DNA连接酶是基因的“针线”，回收PCR产物并酶切后用DNA连接酶将AtCBFI基因连接到T质粒上，以得到T-CBFI重组质粒。构建T-CBFI重组质粒时，同时使用BamH I和SacI进行双酶切，产生不同的黏性末端，可防止目的基因和质粒自身环化、使目的基因和质粒定向连接。(4)为确定转基因抗寒紫花苜蓿是否培育成功，既要从分子水平上用抗体进行抗原一抗体杂交实验，又要在个体水平上鉴定，在低温胁迫条件下观察植株生长状况，检测紫花苜蓿的产量。

2.B【解析】DNA连接酶是将两个DNA片段连接为一个DNA分子，而DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端，B错误。