2022-2023衡水金卷先享题 高三一轮复习40分钟周测卷(福建专版)/生物学(十四)14答案

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21.(12分,除标注外,每空2分)(1)引物(1分)(90~95℃)高温(1分)(2)用酶Ⅱ切割会破坏质粒中Vir区的基因,选择酶Ⅲ只能切割目的基因的一侧,不能将目的基因与质粒连接2(1分)(3)I和Ⅲ(1分)T-DNA携带目的基因(或T-DNA)(4)DNA分子杂交、分子杂交和抗原一抗体杂交用等量的棉花害虫侵染普通棉花和转几丁质酶基因棉花,观察害虫的死亡率(或棉花的染病情况)【解析】(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。PCR时,DNA双链通过加热90~95℃高温变性,使DNA双链解开。(2)质粒中Vir区的基因产物是T-DNA整合到植物基因组中的必备条件,用酶Ⅱ切割会破坏Vr区的基因,4而要用限制酶切割后与质粒连接,必须在目的基因两侧进行切割,产生与酶切后的质粒相同的黏性末端。而选择酶Ⅲ只能切割目的基因的一侧,不能将目的基因与质粒连接。用酶I剪切后,由于是同一种酶剪切,可能出现目的基因与质粒的正向连接和反向连接,故得到的重组质粒有两种。(3)若选两种酶进行切割,所选的酶为I和Ⅲ,用酶Ⅱ切割会破坏Vr区的基因,而选I和Ⅲ既能保证正确剪切目的基因并插入T-DNA中,又能使标记基因在筛选重组质粒时发挥应有的作用。目的基因插入后,将表达载体导入农杆菌中,通过农杆菌的侵染作用,T-DNA携带目的基因进人烟草细胞并可插入至染色体DNA中。(4)目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,必须进行检测和鉴定,其中分子水平的检测技术包括DNA分子杂交、分子杂交和抗原一抗体杂交。目的基因进入受体细胞后是否稳定维持和表达其遗传特性,个体水平要进行抗虫接种实验,即用等量的棉花害虫侵染普通棉花和抗虫棉花(转几丁质酶基因棉花),观察害虫的死亡率(或棉花的染病情况),若转几丁质酶基因棉花表现出抗虫特性,说明几丁质酶基因在棉花体内可以稳定维持和表达其遗传特性。